由於光是直線傳播的，所以檢測器不能在激光源的對麵放置（如果放在光源的對麵，檢測的就是光源的光譜），事實上檢測器，光源和比色皿之間是90度角的關係，所以熒光比色皿需要四麵全透。

　　熒光光度計收集的是受激分子發射的光譜。為了避免激發光，反射光進入檢測器而造成誤差，入射光源和檢測器的方向垂直。

　　由高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中，激發樣品中的熒光物質發出熒光，熒光經過濾過和反射後，被光電倍增管所接受，然後以圖或數字的形式顯示出來。

　　不同物質由於分子結構的不同,其激發態能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現為各種物質都有其特征熒光激發和發射光譜；，因此可以用熒光激發和發射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。